目的：

根據(jù)焦慮性抑郁疾病臨床多病因特點(diǎn)，采用慢性心理應(yīng)激聯(lián)合藥物刺激建立一種焦慮性抑郁動(dòng)物復(fù)合模型；并從動(dòng)物行為學(xué)、血液生化學(xué)、組織形態(tài)學(xué)以及分子生物學(xué)等多方面多層次建立該模型的評價(jià)體系；采用近靈長類動(dòng)物樹鼩建立一種更接近人類臨床的新型焦慮性抑郁動(dòng)物模型。

方法：

1. 66 只 SD 大鼠隨機(jī)分為正常對照組、焦慮模型組、抑郁模型組、束縛應(yīng)激 3 h 組、束縛應(yīng)激 6 h 組、慢性情緒應(yīng)激組，分別進(jìn)行造模。于實(shí)驗(yàn)第 14 d、21 d、28 d 造模結(jié)束后，采用高架十字迷宮和場景恐懼測試測定大鼠的焦慮樣行為，采用曠場測試和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)測定大鼠的抑郁樣行為，Elisa 試劑盒檢測大鼠腦內(nèi)單胺遞質(zhì) 5-HT、DA 含量。

2. 120只SD 大鼠隨機(jī)分為正常對照組、溶媒對照組、焦慮模型組、抑郁模型組、束縛應(yīng)激 6 h 組、皮質(zhì)酮 40 mg/kg 組、束縛應(yīng)激 6 h+皮質(zhì)酮 20 mg/kg 組、束縛應(yīng)激 6 h+皮質(zhì)酮 30 mg/kg 組、束縛應(yīng)激 6 h+皮質(zhì)酮 40 mg/kg 組，分別進(jìn)行造模。采用高架十字迷宮測試、曠場測試、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)測定大鼠的焦慮和抑郁樣行為，Elisa 試劑盒檢測血漿 CRH、ACTH、CORT 含量，HPLC-ECD 法檢測腦內(nèi)單胺遞質(zhì)含量，HE 染色檢測 HPA軸各組織以及腦內(nèi)海馬、杏仁核、前額葉皮質(zhì)區(qū)的病理損傷情況，Western-blotting 法檢測腦內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表達(dá)情況。

3. 12只中緬樹鼩隨機(jī)分為正常組、模型組、藥物組，模型組按照前期建立的焦慮性抑郁造模方法進(jìn)行造模，藥物組于造模同時(shí)給予文拉法辛（6 mg/kg）進(jìn)行干預(yù)，持續(xù)21 d。采用自主活動(dòng)評分、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、Morris 水迷宮評價(jià)樹鼩的行為表現(xiàn)，Elisa 試劑盒檢測樹鼩血漿 CRH、ACTH、COR 含量，HPLC-ECD 法檢測樹鼩腦內(nèi)單胺遞質(zhì)含量，HE 染色觀察樹鼩腦內(nèi)海馬、杏仁核、下丘腦等組織的病理損傷情況。

結(jié)果：

1. 優(yōu)選出束縛應(yīng)激 6 h（21 d）作為z佳的焦慮性抑郁心理應(yīng)激模型束縛應(yīng)激 3 h 組始終未見明顯的焦慮和抑郁樣行為，腦內(nèi) 5-HT、DA 含量與對照組比較無差異；CES 組焦慮樣行為明顯，但在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中并未表現(xiàn)出抑郁樣行為，5-HT、DA 含量相比于對照組大鼠還有上升趨勢；束縛應(yīng)激 6 h 組于造模 14 d開始表現(xiàn)出焦慮和抑郁樣行為，到 21 d 時(shí)行為表現(xiàn)趨于穩(wěn)定，同時(shí)腦內(nèi) 5-HT、DA 含量下降較為明顯，可作為z佳的焦慮性抑郁心理應(yīng)激模型。

2. 采用慢性束縛應(yīng)激 6 h 聯(lián)合皮質(zhì)酮 30 mg/kg 的方法建立焦慮性抑郁動(dòng)物復(fù)合模型，并構(gòu)建該模型的多層次評價(jià)體系21 d 束縛應(yīng)激聯(lián)合皮質(zhì)酮 30 mg/kg 組大鼠進(jìn)入開臂的時(shí)間、次數(shù)、曠場中自主活動(dòng)次數(shù)均較對照組及抑郁組有顯著差異，強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間較對照組及焦慮組顯著增加，焦慮樣和抑郁樣行為均十分明顯；同時(shí)，與對照組比較，該模型組大鼠血漿 CRH、ACTH、CORT 含量顯著上升，HPA 軸亢進(jìn)；各腦區(qū)單胺遞質(zhì) 5-HT、NE、DA 的含量和神經(jīng)營養(yǎng)蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表達(dá)均明顯下降，單胺能系統(tǒng)失衡，神經(jīng)營養(yǎng)缺失；此外，病理切片發(fā)現(xiàn)該模型組大鼠 HPA 軸以及各腦區(qū)均存在較為明顯的損傷。

3. 采用近靈長類動(dòng)物樹鼩成功建立一種新型的焦慮性抑郁動(dòng)物模型模型組樹鼩自主活動(dòng)評分、糖水偏食度、學(xué)習(xí)記憶能力均明顯下降，血漿 CRH、ACTH、COR含量較正常組顯著上升，腦內(nèi)單胺遞質(zhì)含量下降，病理損傷明顯；給予文拉法辛干預(yù)后，模型樹鼩的行為表現(xiàn)得到改善，血漿 CRH、COR 含量下降，各腦區(qū)5-HT、NE、DA 含量均有一定程度的回升，其中以 5-HT   Z為顯著，符合該藥物提升腦內(nèi) 5-HT和 NE 濃度的臨床治療機(jī)制，該藥物預(yù)見性研究證實(shí)焦慮性抑郁樹鼩模型建立成功。

結(jié)論：

綜上，本研究通過優(yōu)選的心理應(yīng)激模型聯(lián)合皮質(zhì)酮注射，通過多濃度多時(shí)間點(diǎn)分析，終確定 21d 束縛應(yīng)激 6 h 聯(lián)合皮質(zhì)酮 30 mg/kg 能成功建立焦慮性抑郁動(dòng)物復(fù)合模型；在此基礎(chǔ)上，從動(dòng)物行為學(xué)、血液生化學(xué)、組織形態(tài)學(xué)以及分子生物學(xué)等多方面多層次綜合分析，建立了一套系統(tǒng)的該模型評價(jià)體系；然后進(jìn)一步以樹鼩為研究對象，建立一種更接近人類臨床的新型焦慮性抑郁動(dòng)物模型。